RESUMO Dentre as doenças fúngicas, a mancha marrom de Alternaria (MMA) é a doença mais importante para tangor “Murcott”, causando desfolha, mancha e queda de frutos e, com isso, acarretando muitos prejuízos. Nesse trabalho foi avaliada a eficiência de trifloxistrobina e tebuconazol, em formulação comercial, combinados com pirimetanil, em duas dosagens, e combinado com cobre solúvel em água, comparado com oxicloreto de cobre, no controle da MMA em pomar de tangor ‘Murcott’, com 15 anos de plantio, em Estiva Gerbi/SP. Os tratamentos foram constituídos pela mistura de tanque de trifloxistrobina e tebuconazole a 0,80 L ha-1 com os seguintes fungicidas (L ou kg de produto comercial 2000 L-1): T1- pirimetanil (1,0); T2- pirimetanil (1,5); T3- sulfato de cobre solúvel (1,0); T4- oxicloreto de cobre (3,60). Foi adotado o delineamento de Split-block, em subparcelas, com três repetições de dez plantas na linha entre as duas linhas adjacentes. Os fungicidas foram aplicados mediante turbopulverizador FM Copling, sendo empregada uma vazão de 100 mL (m3) -1. No total foram realizadas 17 aplicações de fungicidas, em intervalos que variaram de 12 a 15 dias. As avaliações consistiram na determinação dos níveis de severidade dos sintomas nos frutos, determinados em três épocas (S1, S2 e S3) a determinação do número de cicatrizes nos frutos, quando realizada a colheita. Verificou-se que os tratamentos constituídos pelas combinações de trifloxistrobina e tebuconazole e pirimetanil, em duas dosagens, foram eficientes no controle do patógeno, assemelhando-se aos resultados do tratamento padrão, representados pela combinação de trifloxistrobina e tebuconazole com oxicloreto de cobre.

ABSTRACT Among fungal diseases, Alternaria brown spot (ABS) is the most important disease for “Murcott” tangors, causing leaf drop, spots, fruit drop and consequently heavy losses. The present study evaluated the efficiency of two levels of trifloxystrobin and tebuconazole, in commercial formulation, combined with pyrimethanil or water-soluble copper, in comparison with copper oxychloride, on ABS control in a 15-year-cultivation “Murcott” tangor orchard in Estiva Gerbi, Sao Paulo State, Brazil. Treatments were composed of the tank mixture of trifloxystrobin and tebuconazole at 0.80 L ha-1 with the following fungicides (L or kg commercial product 2000 L-1): T1 - pyrimethanil (1.0); T2 - pyrimethanil (2.0); T3 - soluble copper sulfur (1.0); T4 - copper oxychloride (3.60). Split-block design was adopted, in subplots, with three replicates containing ten plants on the row between two adjacent rows. Fungicides were applied with an FM Copling turbo sprayer, at a flow of 100 mL (m3) -1. In total 17 fungicide applications were performed at intervals varying between 12 and 15 days. Evaluations consisted of determining the severity levels of symptoms on fruits in three periods (S1, S2 and S3) and the number of injuries on fruits at harvest. Treatments combining trifloxystrobin and tebuconazole with pyrimethanil, in two levels, were efficient in controlling the pathogen, similarly to the results of the standard treatment, represented by the combination of trifloxystrobin and tebuconazole with copper oxychloride.

RESUMO A mancha preta dos citros é uma doença severa para a citricultura do Estado de São Paulo. Parte do seu manejo é focado no controle químico usando fungicidas cúpricos e estrobilurinas. Este trabalho teve o objetivo de avaliar a eficácia de três fontes e três concentrações de fungicidas cúpricos (hidróxido de cobre, oxicloreto de cobre e óxido cuproso). Frutos de laranjeira ‘Pera’ foram ensacados nas plantas seguido de tratamento com fungicida cúprico. Posteriormente, após zero; sete; 14; 21 e 28 dias tais frutos foram inoculados com Phyllosticta citricarpa (1x104 conídios mL-1), por pulverização, seguido de novo ensacamento. A avaliação da incidência e severidade da doença ocorreu na colheita dos frutos. Um segundo experimento, sob infecção natural, foi constituído pelos mesmos tratamentos, sendo os fungicidas aplicados nos estádios F1 (queda de pétalas) e F2 (frutos com 1cm de diâmetro) mediante pulverização tratorizada e vazão média 7,35 L calda planta-1. Subsequentemente, e de forma semelhante para todos os tratamentos, foram realizadas quatro aplicações de azoxistrobina (30 g de i.a./ha) acrescida de óleo mineral a 0,25%. Foram realizadas quatro avaliações mensais para determinação da incidência e severidade dos sintomas. Concluiu-se que: as pulverizações iniciais com fungicidas cúpricos são fundamentais para o controle da mancha preta dos citros; independente das condições de condução, para ambos os ensaios o fungicida hidróxido de cobre propiciou a melhor resposta de controle da mancha preta dos citros com a menor dosagem de cobre metálico (43,7 g de Cu++100L-1).

ABSTRACT Citrus black spot (CBS) is a severe disease for citriculture in the São Paulo State, Brazil. Part of its management is focused on chemical control using cupric fungicides and strobilurins. The objective of the present work was to evaluate the efficacy of three sources and three concentrations of cupric fungicides (copper hydroxide, copper oxychloride and cuprous oxide). Orange fruits of the Pera cultivar were bagged in the plants and the treatment with cupric fungicide was applied. The fruits were inoculated (by spray) with Phyllosticta citricarpa (1×104 conidia mL-1) after 0, 7, 14, 21, and 28 days, and bagged again. The evaluation of incidence and severity was did at the harvest time of fruits. A second experiment was conducted under natural infection with the same treatments, consisting of application of fungicides at the stages F1 (petal fall) and F2 (fruits with diameter of 1 cm), using mechanized sprayer with mean flow of 7.35 L solution plant-1. Subsequently, all treatments received four applications of azoxystrobin (30 g ha-1), plus mineral oil at 0.25%. Four monthly evaluations were done to determine the CBS incidence and severity. The initial applications with cupric fungicides are essential for the control of CBS; the fungicide copper hydroxide showed the best control of CBS with the lowest rate of metallic copper (43.7 g of Cu++ 100 L-1) in both experiments, regardless of the conduction conditions.

RESUMO A Mancha Preta dos Citros causada pelo fungo Phyllosticta citricarpa é uma doença que causa lesões em frutos e queda prematura em estágios mais severos. O uso de fungicidas sistêmicos é a principal medida de controle, porém a busca por um controle alternativo pode envolver a aplicação de fungicidas cúpricos isoladamente, em intervalos reduzidos. Sendo assim, o trabalho teve como objetivo verificar o controle de MPC mediante a aplicação de oxicloreto de cobre em diferentes concentrações. O experimento foi instalado no município de Bebedouro/SP durante a safra 2014/15, variedade ‘Valência’, em delineamento em blocos casualizados. Os tratamentos foram constituídos pelas concentrações: zero (testemunha), 31; 24,5; 18,5; 12,2 e 9,1 mg de cobre metálico/m3, tendo como referência o fungicida oxicloreto de cobre (588 g L-1 de oxicloreto de cobre ou 350 g de cobre metálico; formulação SC) e, um tratamento adicional, constituído pela aplicação do fungicida cúprico óxido cuproso e fungicida do grupo da estrobilurina. As aplicações foram realizadas em intervalos de catorze dias, iniciando em 2/3 pétalas caídas, perfazendo um total de 14 aplicações. Foram realizadas cinco avaliações de incidência e severidade em intervalos de 30 dias, estendendo-se até meados de novembro, quando foi realizada a colheita dos frutos. A partir desses dados foi calculada a área abaixo da curva de progresso da doença (AACPD). Concluiu-se que aplicações em intervalos de catorze dias de oxicloreto de cobre SC a 31 e 24,5 mg/m3 copa, foram eficientes no controle de MPC, cuja eficiência foi comparável ao tratamento padrão.

ABSTRACT Citrus black spot (CBS) is a disease caused by the Phyllosticta citricarpa fungus that causes lesions in fruits and, in more severe stages, fruit drops. The use of systemic fungicides is the main control measure for CBS; however, an alternative control measure is the use of cupric fungicides applied alone with short intervals. Therefore, the objective of the present work was to evaluate the effect of applications of copper oxychloride at different rates on the control of CBS. The experiment was conducted in Bebedouro, SP, Brazil, in the 2014/2015 crop season, in a randomized block design, using a Citrus sinensis variety (Valencia). The treatments consisted of copper rates (zero - control; 31, 24.5, 18.5, 12.2, and 9.1 mg of metal copper per cubic meter of canopy) using copper oxychloride (concentrated suspension - CS; 588 g L-1 of copper oxychloride or 350 g L-1 of metal copper), and an additional treatment with application of a cupric fungicide (cuprous oxide) and a strobilurin fungicide. The applications were carried out with 14-day intervals, starting when 2/3 of the petals of the plant's flowers were fallen, totaling 14 applications. The incidence and severity of CBS were evaluated five times with 30-day intervals up to mid-November, when the fruits were harvested. The data were used to calculate the area under the disease progress curve (AUDPC). Applications of copper oxychloride CS at rates of 31 and 24.5 mg m-3 with 14-day intervals are efficient for the control of CBS, with similar efficiency to the farm standard treatment.

RESUMO A podridão floral dos citros (PFC) é uma importante doença dessa cultura, responsável por elevadas perdas de produção. Normalmente, essa doença mostra-se limitante quando ocorrem prolongados períodos chuvosos durante o florescimento das plantas ou quando existe intenso molhamento foliar. Duas espécies de Colletotrichum estão associadas à doença: C. acutatum e C. gloeosporioides. Entretanto, recentemente, tem-se verificado que, mesmo sob condições não tão propícias, a doença tem ocorrido com relativa frequência, suspeitando-se do envolvimento de outras espécies de Colletotrichumou de novas condições de adaptação das espécies descritas. Este trabalho teve como objetivo determinar se há ou não outra espécie de Colletotrichum associada a PFC e avaliar a viabilidade do emprego de marcadores moleculares ISSR na caracterização taxonômica de isolados de Colletotrichum spp. associados a sintomas de PFC em flores, assim como de tecidos foliares e frutos cítricos assintomáticos. Para tanto, foi empregada uma combinação de iniciadores específicos, levando em conta a região ITS e marcadores moleculares ISSR. Os marcadores ISSR mostraram-se eficientes na caracterização taxonômica dos isolados de Colletotrichum analisados. A população avaliada foi constituída apenas por C. acutatum e C. gloeosporioides, descartando o envolvimento de uma espécie adicional. Foi constatada alta diversidade genética entre os isolados analisados, o que também se mostra convergente quanto às diferenças fenotípicas observadas sob condições de campo. Entretanto, não foi encontrada relação quanto à origem e as espécies de Colletotrichum spp. associadas. De modo inédito, ainda que assintomaticamente, foi detectada a presença de um isolado de C. acutatum associado a frutos cítricos.

ABSTRACT Postbloom fruit drop of citrus (PFD) is a serious disease of this crop, accounting for high yield losses. Usually, this disease shows to be limiting when there are prolonged rainy periods during plant flowering or when there is intense leaf wetness. Two Colletotrichum species are associated with the disease: C. acutatum and C. gloeosporioides. However, recently, it has been found that, even under not so favorable conditions, the disease has occurred with some frequency; one suspects the involvement of other Colletotrichum species or new adaptation conditions of the described species. This study aimed to determine whether there is another Colletotrichum species associated with PFD and the viability of using molecular markers ISSR for taxonomic characterization of Colletotrichum spp. isolates associated with PFD symptoms in flowers, as well as of leaf tissues and asymptomatic citrus fruits. For this purpose, we used a combination of specific primers, taking into account the ITS region and ISSR molecular markers. ISSR markers have proven to be effective for taxonomic characterization of the Colletotrichum isolates analyzed. The population assessed consisted only of C. acutatum and C. gloeosporioides, discarding the involvement of an additional species. We found high genetic diversity among the isolates analyzed, which is also shown as converging to the phenotypic differences observed under field conditions. However, no relation was found regarding the origin and associated Colletotrichum spp. species. In an unprecedented way, although asymptomatically, we detected the presence of a C. acutatum isolate associated with citrus fruits.

No presente, foi avaliada a influência do amendoim-forrageiro cv. Amarillis e da gramínea coastcross nas entrelinhas de plantas de laranjeira 'Natal' quanto à produção e liberação de ascósporos de G. citricarpa, e consequente controle da mancha-preta dos frutos cítricos. Os tratamentos avaliados foram: 1- cultivo convencional, sem utilização de fungicidas; 2- cultivo convencional, com utilização de fungicidas; 3- gramínea coastcross, e 4- amendoim forrageiro entre as linhas das plantas. O monitoramento de ascósporos deu-se mediante armadilhas caça-esporos do tipo Quest Volumetric Spore System™. Um total de 33 inspeções foi realizado semanalmente, a partir do final de agosto até início de setembro do ano seguinte. A quantificação da doença deu-se mediante utilização de escala diagramática de notas, sendo também determinada a porcentagem de frutos com padrão comercial. A gramínea coastcross foi o melhor tratamento em reduzir o número de ascósporos liberados, diferindo, estatisticamente, do convencional, porém não dos demais tratamentos. Cultivo intercalar e cultivo convencional associado com aplicações de fungicida foram os mais eficientes quanto à redução da severidade de sintomas da mancha-preta, diferindo do tratamento- -testemunha, sem emprego de fungicida. Esses tratamentos foram os que também proporcionaram a maior porcentagem de frutos com padrão comercial, sendo de 89% a 91%, enquanto no cultivo convencional, sem uso de fungicidas, foi de 73%.

This study highlighted the effect of planting coast-cross grass and forage peanut cv. Amarilis between rows of Natal oranges on spreading of Guignardia citricarpa ascospores and consequent citrus black spot control. Treatments evaluated were: 1- conventional cultivation, free of fungicides; 2- conventional cultivation, using protective fungicides; 3- inter-crop cultivation of coast-cross grass between rows of citrus crops and; 4- inter-cropping cultivation of forage peanut between the rows of citrus crops. Quest Volumetric Spore SystemTM traps were set in order to determine the number of ascospores released. A total of 33 inspections were conducted weekly, from the end of August until early September the following year. A diagrammatic scale was used to determine the severity of the disease as well as the percentage of fruits having a commercial standard. The coast-cross grass was more effective in reducing the number of ascospores produced, whose average statistics were lower than in the conventional treatments, free-fungicides. The inter-crop and conventional cultivation method coupled with fungicide treatment was more effective in reducing the severity of citrus black spot symptoms, and differs statistically from the fungicide-free control method. These methods also resulted in a higher percentage of fruits of a commercial standard, ranging from the 89% through the 91% percentile, and the cultivation, free of fungicides, fell within the 73%.

A mancha preta dos citros (MPC), causada pelo fungo Guignardia citricarpa, produz lesões em frutos, os quais ficam depreciados para o mercado interno e os restringem para a exportação. O grande período de suscetibilidade dos frutos cítricos, em adição ao fato de G. citricarpa causar infecções latentes, dificulta o entendimento sobre o período de incubação da doença. O objetivo do trabalho foi determinar o período de incubação da MPC inoculando frutos de laranjeira 'Valência' em diferentes estádios fenológicos. Para a inoculação foram empregadas suspensões de conídios de G. citricarpa (10³, 10(4), 10(5) e 10(6) conídios mL-1) em diferentes diâmetros dos frutos (1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 5,0 e 7,0 cm). O período de incubação da MPC para os diferentes diâmetros dos frutos inoculados apresentou uma relação polinomial negativa. Em frutos com até 3 cm de diâmetro o período de incubação médio foi superior a 200 dias, enquanto que em frutos com diâmetros superiores a 5 cm o período de incubação médio foi inferior a 84 dias. A MPC apresenta período de incubação variável dependente do estádio fenológico em que os frutos são infectados. A concentração de conídios de G. citricarpa, na infecção, não interfere no período de incubação da doença.

Citrus black spot (CBS), caused by Guignardia citricarpa, causes lesions on fruit that depreciate them for the domestic market and restrain them for export. The long susceptibility period in fruit, in addition to the occurrence of latent infection, difficult the understanding of CBS incubation period. The aim of this study was to determine the incubation period of CBS by inoculating fruits of 'Valencia' orange at different phenological stages. Conidia suspensions of G. citricarpa at different concentrations (10³, 10(4), 10(5) and 10(6) conidia mL-1) were inoculated in fruit of different diameters (1.5, 2.0, 2.5, 3.0, 5.0 and 7.0 cm). The relationship of CBS incubation period with fruit diameter was polynomial negative. The average incubation period for 3 cm fruit was over 200 days, while fruit which were greater than 5 cm in diameter had an average incubation period of less than 100 days. CBS incubation period is therefore variable and depends on the phenological stage in which the fruit have been infected. The concentration of G. citricarpa conidia did not interfere with the incubation period of the disease.

A citricultura apresenta vários problemas fitossanitários, dentre os quais a mancha-preta dos citros (Guignardia citricarpa). O controle desta doença baseia-se no emprego de práticas culturais e no uso de fungicidas. Avaliou-se o efeito do manejo do mato em conjunto com o químico no controle da doença. Os experimentos foram instalados em pomares de laranjeiras-doces, nos municípios de Matão, Rio Claro e Mogi Guaçu, no Estado de São Paulo. No manejo do mato, comparou-se o uso isolado de roçadeira ecológica com o conjugado rastelo mecânico e trincha, aos 35 dias, após 2/3 de pétalas caídas. No controle químico, foram realizadas duas pulverizações com fungicida protetor e de 2 a 5 pulverizações da mistura de produto sistêmico com protetor, aos 45 dias, após 2/3 de pétalas caídas, em intervalos de aplicação de 35 dias. Em todas as aplicações, foi adicionado óleo mineral emulsionável (0,25%). Avaliou-se a área abaixo da curva de progresso da incidência e severidade da doença, com os dados de cinco avaliações realizadas quinzenalmente, a partir da maturidade fisiológica dos frutos. Em todas as áreas, o uso do controle químico, associado com o manejo do mato, reduziu a intensidade da doença.

The citrus plants has several phytosanitary problems, including citrus black spot (Guignardia citricarpa). Control of this disease is based on cultural practices and application of fungicides. The effect of the weed management and chemical control was evaluated. The experiments were carried out in sweet orange orchards in Matão, Rio Claro and Mogi Guaçu municipalities in the state of São Paulo, Brazil. In the experiment of weed management, the use of ecological brushcutter was compared with the use of mechanical rake and brush combined, at 35 days after 2/3 of petals fallen. Chemical control was carried out by two spraying of protective fungicide and from 2 to 5 spraying of systemic and protective fungicides 45 days after 2/3 of petals fallen. The range of these spraying was 35 days and in all of them emulsifiable mineral oil (0.25%) was added. The area under the curve of the incidence progress and severity of the disease was evaluated using data from five evaluations that were realized every 15 days from the physiological maturity of the fruits. The use of chemical control associated with weed management decreased the intensity of the disease in all areas evaluated.

A habilidade de isolados de Bacillus subtilis e Trichoderma spp. em controlar a mancha preta dos frutos cítricos (MPC) foi avaliada em pomares de laranjeira 'Natal'. O primeiro experimento foi conduzido durante a safra de 2001/2002, no qual foram testados quatro isolados de B. subtilis (ACB-AP3, ACB-69, ACB-72 e ACB-77) aplicados de forma isolada ou em mistura, em intervalos de 28 dias, comparando-se com o tratamento fungicida. Dois outros ensaios foram conduzidos durante a safra de 2002/2003, em que os mesmos quatro isolados de B. subtilis e dois isolados de Trichoderma spp. (ACB-14 e ACB-40) foram testados, sendo os isolados aplicados em intervalos de 28 dias no segundo experimento e em intervalos de 15 dias no terceiro experimento. No primeiro experimento, o tratamento com ACB-69 diferiu estatisticamente do tratamento-testemunha, porém não diferiu dos outros agentes de controle biológico ou da mistura dos isolados de Bacillus. No segundo experimento, os tratamentos com ACB-69 e ACB-AP3 resultaram em menores índices de doença em comparação com o tratamento-testemunha. Entretanto, este resultado não se repetiu no terceiro experimento, em que os isolados foram aplicados em intervalos de 15 dias. A severidade de doença foi alta em ambas as safras avaliadas, e o tratamento com fungicida foi o mais efetivo para o controle da doença.

The ability of isolates of Bacillus subtilis and Trichoderma spp. to control citrus black spot (CBS) was investigated in ´Natal´ sweet orange orchards. The first experiment was conducted during the 2001/2002 season and four isolates of B. subtilis (ACB-AP3, ACB-69, ACB-72 and ACB-77), applied every 28 days, alone or in combination were tested and compared with fungicide treatments. Two other experiments were carried out during the 2002/2003 season, where the same isolates of Bacillus and two isolates of Trichoderma (ACB-14 and ACB-40) were tested being applied every 28 days in the second experiment, and every 15 days in the third experiment. In the first experiment, the treatment with ACB-69 differed statistically from the control, but did not differ from other biological control agents or mixture of Bacillus isolates. In the second experiment, the treatments with ACB-69 and ACB-AP3 resulted in smaller disease index compared with the control treatment. However, this result was not repeated in the third experiment, where the isolates were applied every 15 days. Disease severity was high in both evaluated seasons and the fungicide treatment was the most effective for disease control.

A verrugose dos citros, causada pelo fungo Elsinoe fawcettii, encontra-se presente em todas as áreas citrícolas do Brasil. Dada sua importância, o comportamento de acessos e híbridos de tangerinas foi avaliado sob condições naturais de infecção. O estudo envolveu plantas não irrigadas, com 15 anos de cultivo, sendo coletados 100 frutos de três plantas por genótipo, na fase de colheita. Mediante o emprego de escala de notas que variaram de 0 (ausência de sintomas) a 6 (sintomas severos), procedeu-se a avaliação do nível de severidade da doença. Dentre genótipos que mostraram-se resistentes incluem-se Citrus deliciosa, C. tangerina, C. nobilis; um híbrido de mandarina (C. nobilis x C. deliciosa) e um híbrido de satsuma (C. unshiu x C. sinensis). Nos demais genótipos foram encontrados sintomas, cujos níveis de severidade variaram de 1 a 3, enquadrando-os como de moderada resistência.

A citrus scab disease, caused by Elsinoe fawcettii, is currently found in all citrus areas throughout Brazil. That being, given the importance of this casual agent, the behavior of tangerines and hybrids influenced by this pathogen was evaluated under natural infection conditions. This study was performed with plants around 15 years old without irrigation; 100 fruits of three plants were collected during harvest season, using a grade scale varying from 0 (absence of symptoms) to 6 (severe symptoms) the level of disease severity was determined. Among the cultivars, citrus scab resistance was observed in Citrus deliciosa, C. tangerina, C. nobilis; a mandarin hybrid (C. nobilis x C. deliciosa) and a satsuma hybrid (C. unshiu x C. sinensis ). Among the other genotypes, symptoms were observed with levels of severity ranging from 1 to 3, indicating moderate resistance.

O setor citrícola enfrenta sérios problemas representados por doenças de flores e frutos jovens que, além de diminuir a produtividade, depreciam os frutos pelo aspecto que conferem aos mesmos. Tais doenças são representadas, principalmente, pela mancha preta dos frutos cítricos (MPC) e pela queda prematura dos frutos cítricos (QPFC), onde a medida predominante de controle é a pulverização com produtos químicos. Entretanto, os custos financeiros e ambientais de aplicações com tais produtos, aliado às crescentes restrições à presença de resíduos, estão a exigir o estudo de novas alternativas. Entre estas, o controle biológico surge como alternativa importante. Sabendo-se que, o conhecimento da biodiversidade dos seres vivos é importante para determinação de suas funções potenciais, o presente trabalho teve por objetivo estudar a diversidade genética, através de marcadores moleculares AFLP, de 32 isolados de B. subtilis com a finalidade de se encontrar, dentre os mesmos, um (ou mais isolados) que apresentasse maior similaridade com o isolado ACB-69, o qual apresenta potencial para o controle da doença. Diante disso, os resultados obtidos neste trabalho, permitiram concluir que: a) os isolados de B. subtilis estudados agruparam-se no filograma de distância genética, independente da procedência ou do hospedeiro; b) os isolados ACB-69 e ACB-83, com potenciais para o controle da queda prematura dos frutos cítricos, compartilham da mesma ancestralidade, o que pode ser inferido pela metodologia aplicada; c) em termos biológicos; o isolado ACB-83 merece mais estudos quanto à viabilidade de controle de doenças de citros, como a queda prematura dos frutos cítricos e a manha preta dos frutos cítricos, sob condições de campo.

The Brazilian citriculture faces with severe problems concerning blooming and young fruit diseases, which cause crop losses and fruit depreciation for market. Such diseases are represented by the postbloom fruit drop (PFD) and by the black spot of citrus (CBS) whose control measures are predominantly through chemical products. However, the economical and environmental disadvantages associated with chemical treatments besides the increasing restrictions on the residuals of pesticides are strong factors that demand new control measures. Among them, the biological control stands out as being an important alternative. Former studies were carried out in laboratory and field conditions aiming at knowing the potentiality of Bacillus subtilis isolates in the control of the above mentioned diseases. Among the tested isolates, the ACB-69 showed the higher control efficiency. This project was undertaken in order to study, by means of AFLP molecular markers, the genetic diversity of 32 isolates of B. subtilis with the aim of discovering isolates as efficient as ACB-69, which could show a comparable control when tested under natural conditions of the disease occurrence. It was found from the results gathered here that: (i) the studied isolates of B. subtilis were grouped in the phylogram of a genetic distance, regardless of the precedence or host; (ii) the isolates ACB-69 and ACB-83, with potential for the control of the postbloom fruit drop, share the same ancestry, which is inferred by the methodology employed here; (iii) in biological terms, the isolate ACB-83 demands additional studies concerning its feasibility on the control of both diseases in field conditions.

El sector citrícola enfrenta serios problemas representados por enfermedades en las flores y en frutos jóvenes que además de disminuir la productividad, devalúan los frutos por el aspecto que le dan a los mismos. Tales enfermedades están representadas, principalmente, por la mancha negra de los frutos cítricos (MNC) y por la caída prematura de los frutos cítricos (CPFC), donde la medida predominante de control es la pulverización con productos químicos. Entretanto, los costos financieros y ambientales de las aplicaciones con estés productos químicos, sumado a las crecientes restricciones de la presencia de residuos, están a exigir el estudio de nuevas alternativas de control. Entre estas, el control biológico surge como una alternativa importante. Estudios fueron anteriormente realizados, bajo condiciones de laboratorio y de campo, con el objetivo de determinar la potencialidad de aislados de Bacillus subtilis en el control de las enfermedades mencionadas arriba, puesto que, uno aislado, el ACB-69 fue el que presentó la mejor eficiencia de control. Frente a lo anteriormente expuesto y, sabiendo que, el conocimiento de la biodiversidad de los seres es importante para la determinación de sus funciones potenciales, el presente proyecto de investigación tuvo como objetivo estudiar la diversidad genética, a través de marcadores moleculares AFLP, de 32 aislamientos de B. subtilis con la finalidad de se encontrar, dentro los mismos, uno (o más aislados) que presentase mayor semejanza con el ACB-69 y que cuando testado, bajo condiciones naturales de ocurrencia de las enfermedades, si puede encontrar similar control. En función de los resultados experimentales obtenidos, se concluyo que: (a) los aislados de B. subtilis estudiados se agruparon en el filograma de distancia genética, independiente de la procedencia o del huésped; (b) los aislados ACB-69 y ACB-83, con potencial para el control de la caída prematura de los frutos cítricos, comparten la misma ancestralidad, lo que puede ser evaluado por la metodología aplicada; c) en términos biológicos, el aislado ACB-83 merece mas estudios cuanto a la viabilidad de control de las enfermedades caída prematura de los frutos cítricos y de la mancha negra, bajo condiciones de campo.

O objetivo deste trabalho foi determinar o comportamento de variedades de laranjas-doces quanto à resistência a Guignardia citricarpa, agente causal da mancha preta dos citros (MPC). Os ensaios foram conduzidos em dois campos, nos municípios de Rincão e Tambaú, SP. As mudas foram formadas em viveiro localizado na Estação Experimental de Citricultura de Bebedouro-SP. Para tal, foram utilizadas borbulhas de plantas cítricas existentes no Banco Ativo de Germoplasma de Citros da Estação Experimental de Citricultura de Bebedouro (EECB), Bebedouro-SP. Avaliou-se a severidade da doença por meio de escala de notas, de zero (ausência de sintomas) a seis (sintomas severos). A partir de tais dados, foi calculado o valor do índice de doença (ID). Em 2007, no experimento de Rincão, dentre as 65 variedades avaliadas, apenas 59 produziram frutos, sendo constatada ausência de sintomas da doença em Castellana, Maçã e Olivelands. Nas demais variedades, os níveis de severidade variaram de 0,35 para Grada a 3,0 para China SRA-547. Para Tambaú, os valores de severidade variaram de 0,40 para a variedade Cadenera a 2,46 para Pera. No ano de 2008, em Rincão, todas as variedades mostraram-se suscetíveis. Os níveis de severidade verificados variaram de 0,18 para a variedade Belladona, e 3,92 para Vera 97. Em Tambaú, somente a variedade Navelina não apresentou sintomas da MPC. Foi observado que, dentre as plantas que frutificaram, e com exceção daquelas cujos frutos mostraram-se assintomáticos, os valores de severidade variaram de 0,11 para a variedade Tua Mamede a 3,57 para Amares.

The objective of this research was to determine the variety behavior of sweet oranges as to their resistance to Guignardia citricarpa, a causal agent of citrus black spot (CBS). The tests were conducted in two fields in the cities of Rincão and Tambaú, SP. The seedlings were formed in a nursery located in the Experimental Station of Citriculture (EECB) in Bebedouro, SP. For this, citrus plant buds present in the Active Bank of Citrus Germoplasm (EEBC), were used. The severity of the disease was evaluated by using a grade scale from zero (absence of symptoms) to six (maximum severity). Using this data the disease index (DI) was calculated. In the 2007 harvest, the tests in Rincão showed that only 59 out of the 65 varieties evaluated produced fruit, verifying the absence of the disease symptoms in Castellana, Maçã and Olivelands. In the other varieties, the severity levels vary between 0.35 in Grada, and 3.0 in China SRA-547. In Tambaú, the severity values varied from 0.40 in Cadenera, and 2.46 in Pêra. In 2008, all of the varieties in Rincão showed to be susceptible. The severity levels verified, varied from 0.18 in Belladona and 3.92 in Vera 97. In Tambaú, only the Navelina variety showed no CBS symptoms. Among the plants that flourished, it was observed that the values of severity varied from 0.11 in Tua Mamede and 3.57 in Amares, with the exception of those whose fruits showed to be asymptomatic.

A queda prematura dos frutos cítricos (QPFC), causada por Colletotrichum acutatum, dados os grandes prejuízos que têm causado aos produtores, constitui-se numa doença de grande importância econômica. O controle da doença é feito predominantemente mediante uso de fungicidas, que eleva o custo de produção e afeta negativamente o meio ambiente. Diante disso, este trabalho teve por objetivo buscar um método alternativo de controle da QPFC, mediante o uso de agentes de biocontrole ou de biofertilizantes. Diferentes concentrações de biofertilizantes (originários de duas fontes distintas e denominados de Bio1 e Bio 2); três isolados de Bacillus subtilis (ACB-69; 72 e 77) e três isolados de Trichoderma spp. (ACB-14; 37 e 39) foram testados, isoladamente ou em combinação, sob condições de laboratório, quanto à capacidade inibitória da germinação de conídios de C. acutatum. Estudaram-se, ainda, a produção de metabólitos termoestáveis por B. subtilis e o efeito sobre a germinação do patógeno. Quinze isolados de B. subtilis foram testados quanto à capacidade de prevenir a infecção por C. acutatum em flores destacadas de lima- ácida 'Tahiti' e, no campo, foram instalados dois experimentos, visando a testar ACBs e biofertilizantes no controle da doença. Verificou-se que o isolado ACB-72 (B. subtilis) e ACB-37 (T. pseudokoningii) foram os que mais inibiram a germinação do patógeno. Quanto à produção de metabólitos termoestáveis, ACB-69 e 77 foram os mais eficientes em produzir substâncias antifúngicas, e em quantidades suficientes para inibirem a germinação do patógeno. A mistura dos quatro isolados de Bacillus (ACBs: 69; 72; 77 e AP3) foi o que apresentou maior porcentagem de inibição (73%). Os biofertilizantes (Bio1 e Bio2), em concentrações acima de 10% e, quando em associação com isolados de Trichoderma spp., promoveram maiores inibições na germinação de C. acutatum. Em testes com flores destacadas, verificou-se que, onde foram aplicados os ACBs 69; 76; 74 e 77, as porcentagens de pétalas sem sintomas de infecção por C. acutatum foram de 83; 92; 92 e 97%, respectivamente. Mediante avaliações a campo, verificou-se a potencialidade de B. subtilis e de biofertilizantes em controlar a doença.

Postbloom Fruit Drop of Citrus (PDF), caused by Colletotrichum acutatum, has caused losses to citrus producers and therefore it is economically very important. This disease is generally controlled by fungicide sprayings, which increase the production cost, and affects the environment. Thus, this work aimed at developing an alternative control method through the use of biocontrol agents, or biofertilizers. Different concentrations of biofertilizers (from two distinct sources and named Bio1 and Bio2), three strains of Bacillus subitlis (BCA-69, 72 and 77) and three isolates of Trichoderma spp. (BCA-14, 37 and 39) were tested, in vitro, alone or in combination, for the inhibitory capacity of conidia germination of C. acutatum. It was studied the production of thermo-stable metabolites by B. subtilis and their effect on the germination of C. acutatum conidia. Under in vivo conditions, 15 isolates of B. subtilis were tested for the ability to prevent C. acutatum infection on 'Tahiti' lime detached flowers and in the field, where two experiments were installed, for testing the BCA and biofertilizers in the control of the disease. It was found that the isolate BCA-72 (B. subtilis) and BCA-37 (T. pseudokoningii) were the most efficient in inhibiting conidia germination. BCA69 and BCA-77 were the most effective in producing anti-fungal substances, and in quantities sufficient to inhibit the germination of C. acutatum. The mixture of four strains of Bacillus (BCA: 69, 72, 77 and AP3) presented the highest percentage of inhibition (73%). Regarding the use of biofertilizers (Bio1 and Bio2), it was observed that concentrations above 10% of the product, when combined with the strains of Trichoderma spp. decreased the pathogen germination. The experiments with detached flowers showed that the flowers where the BCA: 69, 76, 74 and 77 were applied presented 83, 92, 92 and 97% respectively, of the petals without symptoms of infection by C. acutatum. Field tests showed the potential of B. subtilis and biofertilizers in controlling the disease.

Os níveis de incidência e severidade de sintomas das doenças resultam da interação hospedeiro-patógeno-ambiente. Nesse contexto, a favorabilidade do ambiente, em particular, depende do nível de umidade, intensidade de radiação solar, luminosidade e molhamento foliar, dentre outros fatores. Por outro lado, a magnitude de expressão desses fatores é dependente do ciclo e porte das plantas, e possivelmente, também, do alinhamento de plantio. No presente estudo, foi avaliada a influência dos alinhamentos de plantio N-S, L-O, NE-SO E NO-SE no desempenho agronômico de plantas de laranjas 'Natal'e 'Valência', assim como na severidade de sintomas da mancha-preta-dos-citros (MPC), causada por Guignardia citricarpa. Para tal, foram selecionadas cinco propriedades distribuídas ao longo do cinturão citrícola paulista, de talhões semelhantes, a partir das quais foram coletadas amostras de 50 frutos, em dez plantas de mesma linha, da região central dos mesmos. Tais frutos foram levados para laboratórios e analisados quanto aos níveis de severidade de sintomas da MPC, produção e qualidade do suco. Constatouse que os frutos oriundos de pomares implantados no alinhamento N-S apresentavam menores níveis de severidade da doença, enquanto no alinhamento NE-SO, os mais elevados. Propriedades localizadas mais ao sul do Estado de São Paulo apresentaram menores níveis de doença, provavelmente em consequência da ocorrência recente da doença em tais áreas. Em relação à produção, os alinhamentos de plantio N-S e L-O proporcionaram maior número de frutos por planta, assim como quanto ao número de caixas por planta. Por outro lado, a menor produção foi verificada nos alinhamentos NO-SE. Em relação à qualidade do suco, não foi possível estabelecer um padrão definido em termos de ratio e ºBrix e os respectivos alinhamentos de plantio. Foi verificado que os valores de ratio foram menores nos frutos de pomares localizados mais ao sul do Estado, de maiores latitudes.

The levels of incidence and severity of disease symptoms are a result of the host-pathogenenvironment integration. in this context, a favorable environment, in particular, depends on the level of humidity, intensity of solar radiation, luminosity and leaf wetness among other factors. on the other side, the magnitudes of these factors' expressions are dependent upon the plant's cycle and size, and possibly the crop alignment as well. In the present study, five properties distributed along the citrus agricultural belt of São Paulo were selected. With similar orchards and crop orientation going north-south, east-west, northeast-southwest and northwest-southeast, from which samples of 50 fruits from ten plants of the same central tree line were collected. These fruits were taken to a laboratory and analyzed for severity levels of citrus black spot (Guignardia citricarpa), production and juice quality. it was concluded that the fruits from crops in the east-west orientation presented lower symptom severity, while the north-south orientation, had the highest levels. Also, the farms located further south of São Paulo state, showed lower levels of the disease, probably due to the fact that such areas have shorter periods of disease occurrences. in relation to production, the north-south and east-west crop orientations produced the highest amount of boxes per plant, while the northwest-southeast and northeast-southwest had the lowest production levels. As for the juice quality, there was no concluding data to establish a defined standard in terms of ratio and ºBrix on the respective crop alignment. The relation between the latitude and ratio value was declared to be consistently lower in citrus orchards located further south in the state of Sao Paulo.

Mudas de mamoeiro da cultivar Baixinho de Santa Amália foram transplantadas para covas de 40x60x40 cm, em áreas de três estruturas contíguas: (a) estufa sombreada (cobertura de plástico), (b) estufa sombreada + sombrite (cobertura adicional de sombrite com 30% de sombreamento sobre o plástico) e (c) telado (cobertura exclusiva de sombrite 30%). Ao lado de tais estruturas foi implantada uma área de cultivo de mamoeiro em ambiente natural. Os tratos culturais aplicados foram os condizentes às normas técnicas vigentes na agricultura orgânica. As irrigações foram procedidas com mangueira plástica, evitando-se molhar folhas e frutos. Aos 45 dias pós-transplantio e, subseqüentemente, a intervalos mensais, as plantas foram inspecionadas em relação à incidência de lesões foliares causada pelo fungo Asperisporium caricae. Para efeito de análise estatística, após o teste de homogeneidade das variâncias, foram consideradas quatro repetições por ambiente (tratamento), com seis plantas úteis por parcela. O modelo de quantificação da doença indicou efeito altamente significativo dos ambientes protegidos, estufa e estufa sombreada, quanto à incidência de sintomas, em comparação com ambientes de telado e em área natural de cultivo. Durante os 12 meses de avaliações foi constatada alta correlação entre incidência da doença e pluviosidade e umidade relativa do ar. As estruturas cobertas com plástico demonstraram alto potencial de controle de A. caricae, sendo, portanto, recomendáveis no sistema orgânico de produção do mamoeiro.

Transplants of Baixinho de Santa Amália papaya cultivar were grown in three neighboring plant growth facilities: a) greenhouse (covered with plastic sheet); b) shaded greenhouse (with sombrite 30% black screen over the plastic sheet); c) screenhouse (covered with sombrite 30% only). Next to such structures a plot was settled for cultivation under natural environment. Cultural practices were conducted according to technical regulations for organic production. Irrigations were proceeded with plastic hose avoiding to wet leaves and fruits. From the 45th day after transplanting and subsequently at monthly intervals the plants were monitored in relation to incidence of leaf lesions caused by the fungus Asperisporium caricae. For statistical analysis, after homogeneity of variance test, four repetition were considered within each ambient (= treatment), with six individuals for sampling. The model used for disease quantification indicated a highly significant effect of protected environments greenhouse and shaded greenhouse relating the reduction of leaf lesion numbers compared to screenhouse and natural cropping condition. Disease levels maintained a close correlation with rainfall and air relative humidity during the 12 months of evaluations. The plastic-covered structures showed high potential for controlling A. caricae on papaya leaves and may be recommended for papaya production in the organic system.

Fungos do gênero Guignardia são frequentemente isolados em diferentes espécies de plantas, sendo muitas vezes caracterizados como fungos endofíticos. Entretanto, algumas espécies deste fungo, a exemplo de G. citricarpa e G. psidii, são causadores de importantes doenças que afetam culturas agrícolas, como a Mancha-Preta dos Citros (MPC) e a podridão dos frutos de goiabeira, respectivamente. Também são apontados como causadores de manchas foliares em diferentes espécies de frutíferas e também em outras culturas. Este trabalho teve o objetivo de isolar, identificar e caracterizar a diversidade genética existente entre isolados de Guignardia oriundos de citros, mangueira, goiabeira, eucaliptos, jabuticabeira e pitangueira através da análise da sequência de DNA do cístron ITS1-5,8-S-ITS2. Verificou-se que os isolados obtidos pertencem às espécies G. citricarpa e G. mangiferae. Entretanto, dois grupos encontrados em mangueira não puderam ser identificados em nível de espécie com base em sua sequência de DNA em função da baixa similaridade com as sequências de diferentes espécies de Guignardia já depositadas em banco de dados. Desta forma, goiabeira, eucaliptos, jabuticabeira e pitangueira são hospedeiras de G. mangiferae, enquanto os citros hospedam duas formas, G. citricarpa e G. mangiferae. Já a mangueira é hospedeira de G. mangiferae e de dois outros grupos ainda não identificados. Verificou-se ainda que isolados de Guignardia obtidos de sintomas de podridão de fruto de goiabeira foram identificados como G. mangiferae.

Fungi of Guignardia genera are commonly isolated from different plant species and most of the time they are characterized as endophytics. However, some species of this genus, as G. citricarpa and G. psidii are known as causal agents of serious diseases that affect cultures, such as the Citrus Black Spot and the guava fruit rot, respectively. They are also responsible for diseases that cause foliar spots in different fruit species and also in other cultures. This work has the objective of isolate, identify and characterize the genetic diversity present among Guignardia isolates obtained from citrus, mango, guava, eucalyptus, Brazilian grape tree and Surinam cherry by analysis of DNA sequence from cístron ITS1-5,8SITS2. It was verified that the obtained isolates belong to G. mangiferae and G. citricarpa species. Two different Guignardia types, that were found in mango, could not be identified in species, and do not belong to none of the species deposited in GenBank. So, this work found that mango, guava, eucalyptus, Brazilian grape tree and Surinam cherry host only G. mangiferae, whereas citrus hosts G. mangiferae and G. citricarpa species. Mango hosts three different Guignardia, G. mangiferae and two others types that remain without identification of the species level. It was also verified that isolates of Guignardia obtained from guava fruit rot symptoms were identified as G. mangiferae.